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實驗 血涂片的制作與血細胞的觀察

實驗血涂片的制作與血細胞的觀察

一、引言

血涂片顯微鏡檢查是血液細胞學檢查的基本方法,臨床上應用極為廣泛,特別是對各種血液病的診斷有很大價值,但血涂片制備和染色不良,常使細胞鑒別發生困難,甚至導致錯誤結論,因此,制備厚薄適宜,分布均勻,染色良好的血涂片是血液學檢查的重要基本技術之一。

二、實驗目的

掌握血涂片的制作,觀察血細胞的形態及在不同環境下的反應。

三、實驗器材與試劑

器材:顯微鏡、醫用一次性采血針、酒精棉球、鑷子、經脫脂洗凈的載玻片、蓋玻片等。

試劑:瑞氏染液、0.9%Nacl溶液、蒸餾水等。

四、實驗步驟

1、消毒與采血

先按摩采血部位(人的指腹),使血流通暢,采血前用70%酒精消毒人的指腹,干燥后用采血針刺破指腹,使血液自然流出(第一滴血不要)。取干凈載玻片,讓血滴在離玻片一端中4-5mm處,注意手指持載玻片的邊緣,不觸電及表面,也不能使載玻片接觸取血部位的皮膚。

2、推片

取一塊邊緣光滑的載玻片做推片。將其一端置于血滴前方,向后移動到接觸血滴,使血液均勻分散在推片與載玻片呈30-40o角,向另一端平穩地推出(圖1)。涂片推好后,迅速在空氣中搖,使之自然干燥。

實驗  血涂片的制作與血細胞的觀察

圖1 推片示意圖

3、染色

用特種玻璃鉛筆在血膜兩側畫兩條線,防止染液外溢。再將瑞氏染色液(伊紅-亞甲基藍)滴在血膜上,至染液淹沒全部血膜,染30秒。加等量蒸餾水與染色液混合后再染5分鐘。最后用蒸餾水把染色液洗掉,用吸水紙吸干,自然干燥后,即可觀察。

4、封片

經染色的涂片完全干燥后,用中性樹膠封片保存。

五、結果觀察

顯微鏡下觀察血涂片結果如圖2所示。血細胞包括紅細胞、白細胞和血小板。