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血液涂片的制作與染色

血液涂片的制作與染色

日期:2010-06-04來源:?作者:?點擊:1031次 ??

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核心提示:做好血液涂片和正確染色是血液細胞檢驗的重要步驟,涂片和染色效果的好壞直接關系著檢驗的結果,必須以認真負責的態度注意操作過程的每一個環節

做好血液涂片和正確染色是血液細胞檢驗的重要步驟,涂片和染色效果的好壞直接關系著檢驗的結果,必須以認真負責的態度注意操作過程的每一個環節。??

一.玻片的清潔?

1.一般清洗法?

(1)將玻片放入肥皂或洗衣粉水中煮沸20 分鐘。?

(2)用熱水將肥皂和血膜等污物洗去,再用自來水反復沖洗,最后再用蒸餾水沖洗3 ~5 次。必要時再置95%乙醇中浸泡1小時,然后擦干或烘干備用。新玻片常有游離堿質,因此應用清潔液或10 %鹽酸浸泡24小時,然后分別用自來水及蒸餾水徹底洗滌。?

2.油污載片清洗法?

(1)清洗液?

甲液:10g/L的過錳酸鉀水溶液,乙液:25g/L的草酸水溶液。

(2)清洗方法:將用過的玻片投入甲液數小時,取出后再投入乙液數小時,然后用自來水和蒸餾水沖洗干凈后再置95%乙醇中,以毛巾擦干凈即成。久用后甲液可出現泥沙樣沉淀,乙液有乳白色沉淀,可用棉花濾去再用,如乙液褪色應重新配置。?

二.血涂片制作?

取末梢血1滴,置載玻片一端,取另一邊緣光滑的推片,放在血滴前面慢慢后移,接觸血滴后稍停。血液即沿推片散開,將推片與載片保持30 ~45°角,向前平穩均勻推動推片,載片上便留下一層薄血膜。血涂片制成后,立即在空氣中揮動,使其迅速干燥,以免血細胞變形。血膜干燥后,用鉛筆在血膜的一側寫上病人姓名或編號。?

一張良好的血片,厚薄要適宜,頭體尾要明顯,細胞分布要均勻,膜的邊緣要整齊,并留有一定的空隙。?

涂片時,血滴愈大,角度愈大,推片速度愈快則血膜愈厚,反之血膜愈薄。太薄的血膜片50%的白細胞集中于邊緣或尾部,不利于白細胞分類。如果血膜分布不勻,主要是推片不整齊,用力不均勻,載片不清潔所致。?

三.染色

1.瑞氏染色法(Wright staining)?

本法的特點是將固定和染色合并在一起進行,手續簡便,染色時間短,對白細胞中的特異性顆粒著色較好,但對核的著色較差。?

(1)原理瑞氏染粉是由伊紅和美藍混合后組成的一種中性鹽染料。伊紅是一種酸性染料,為伊紅鈉鹽,其有色部分為陰離子;美藍是一種堿性染料,為氯化美藍,有色基團為陽離子。如以M+代表美藍,以E-代表伊紅,其反應式為:?

M+Cl-? +Na+E→ ME↓+NaCl?